Annexin A5 (eller annexin V ) är ett cellulärt protein i annexingruppen . Inom flödescytometri används annexin V vanligtvis för att detektera apoptotiska celler genom dess förmåga att binda till fosfatidylserin , en markör för apoptos när det finns på plasmamembranets yttre broschyr. Proteinets funktion är okänd; annexin A5 har emellertid föreslagits spela en roll i hämningen av blodkoagulation genom att konkurrera om fosfatidylserinbindningsställen med protrombin och även för att hämma aktiviteten av fosfolipas A1 . Dessa egenskaper har hittats genom in vitro -experiment.
Antikroppar riktade mot annexin A5 finns hos patienter med en sjukdom som kallas antifosfolipidsyndromet (APS), en trombofil sjukdom associerad med autoantikroppar mot fosfolipidföreningar.
Annexin A5 bildar en sköld runt negativt laddade fosfolipidmolekyler. Bildandet av en annexin A5-sköld blockerar fosfolipiders inträde i koagulationsreaktioner (koagulering). Vid antifosfolipidantikroppssyndromet störs bildandet av skölden av antikroppar. Utan skölden finns det en ökad mängd fosfolipidmolekyler på cellmembranen, vilket påskyndar koagulationsreaktioner och orsakar blodkoagulering som är karakteristisk för antifosfolipidantikroppssyndromet. Annexin A5 visade uppreglering vid papillärt sköldkörtelkarcinom .
Laboratorieanvändning
Annexin A5 används som en icke-kvantitativ sond för att detektera celler som har uttryckt fosfatidylserin (PS) på cellytan, en händelse som hittas i apoptos såväl som andra former av celldöd. Blodplättar exponerar också PS och PE på ytan när de aktiveras, vilket fungerar som bindningsställe för olika koagulationsfaktorer.
Annexin A5-affinitetsanalysen använder typiskt ett konjugat av annexin V och en fluorescerande eller enzymatisk markör, biotin eller andra taggar, eller ett radioelement, i en lämplig buffert (annexin V-bindning till aminofosfolipider är Ca2+-beroende ) . Analysen kombinerar annexin V-färgning av PS- och PE-membranhändelser med färgning av DNA i cellkärnan med propidiumjodid (PI) eller 7-Aminoactinomycin D (AAD-7), vilket skiljer livsdugliga celler från apoptotiska celler och nekrotiska celler. Detektion sker med flödescytometri eller ett fluorescensmikroskop .
Cederholm A, Frostegård J (jun 2007). "Annexin A5 som en ny aktör för att förebygga aterotrombos vid SLE och i den allmänna befolkningen". Annals of the New York Academy of Sciences . 1108 (1): 96–103. doi : 10.1196/annals.1422.011 . PMID 17893975 . S2CID 29296971 .
Huber R, Berendes R, Burger A, Schneider M, Karshikov A, Luecke H, Römisch J, Paques E (feb 1992). "Kristall- och molekylstruktur av mänskligt annexin V efter förfining. Implikationer för struktur, membranbindning och jonkanalbildning av annexinfamiljen av proteiner". Journal of Molecular Biology . 223 (3): 683–704. doi : 10.1016/0022-2836(92)90984-R . PMID 1311770 .
Tait JF, Frankenberry DA, Shiang R, Murray JC, Adler DA, Disteche CM (1992). "Kromosomal lokalisering av den mänskliga genen för annexin V (placentalt antikoagulerande protein I) till 4q26----q28". Cytogenetik och cellgenetik . 57 (4): 187–92. doi : 10.1159/000133143 . PMID 1683830 .
Huber R, Schneider M, Mayr I, Römisch J, Paques EP (nov 1990). "Kalciumbindningsställena i humant annexin V genom analys av kristallstruktur vid 2,0 A-upplösning. Implikationer för membranbindning och kalciumkanalaktivitet". FEBS Bokstäver . 275 (1–2): 15–21. doi : 10.1016/0014-5793(90)81428-Q . PMID 2148156 . S2CID 8975064 .
Funakoshi T, Heimark RL, Hendrickson LE, McMullen BA, Fujikawa K (aug 1987). "Humant placenta antikoagulerande protein: isolering och karakterisering". Biokemi . 26 (17): 5572–8. doi : 10.1021/bi00391a053 . PMID 2960376 .
Iwasaki A, Suda M, Nakao H, Nagoya T, Saino Y, Arai K, Mizoguchi T, Sato F, Yoshizaki H, Hirata M (nov 1987). "Struktur och uttryck av cDNA för en hämmare av blodkoagulation isolerad från human placenta: ett nytt lipokortinliknande protein". Journal of Biochemistry . 102 (5): 1261–73. doi : 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a122165 . PMID 2963810 .
Funakoshi T, Hendrickson LE, McMullen BA, Fujikawa K (dec 1987). "Primär struktur av humant placenta antikoagulerande protein". Biokemi . 26 (25): 8087–92. doi : 10.1021/bi00399a011 . PMID 2964863 .
Demange P, Voges D, Benz J, Liemann S, Göttig P, Berendes R, Burger A, Huber R (Jul 1994). "Annexin V: nyckeln till att förstå jonselektivitet och spänningsreglering?". Trender inom biokemiska vetenskaper . 19 (7): 272–6. doi : 10.1016/0968-0004(94)90002-7 . PMID 7519374 .
Fernández MP, Morgan RO, Fernández MR, Carcedo MT (november 1994). "Genen som kodar för humant annexin V har en TATA-fri promotor med högt G+C-innehåll". Gene . 149 (2): 253–60. doi : 10.1016/0378-1119(94)90157-0 . PMID 7958998 .
1a8a : RÅTTANNEXIN V KOMPLEXERAD MED GLYCEROFOSFOSERIN
1a8b : RÅTTANNEXIN V KOMPLEXERAD MED GLYCEROFOSFOTANOLAMIN
1anw : EFFEKTEN AV METALLBINDNING PÅ STRUKTUREN AV BILAGA V OCH KONSEKVENSER FÖR MEMBRANBINDNING
1anx : KRISTALSTRUKTUREN AV EN NY HÖGKALCIUMFORM AV BILAGA V
1avh : KRISTAL OCH MOLEKYLÄR STRUKTUR HOS MÄNNISKA BILAGA V EFTER FÖRFINIERING. KONSEKVENSER FÖR STRUKTUR, MEMBRANBINDNING OCH JONKANALBILDNING AV ANNEXIN-FAMILJEN AV PROTEINER
1avr : KRISTAL OCH MOLEKYLÄR STRUKTUR HOS MÄNNISKA BILAGA V EFTER FÖRFINIERING. KONSEKVENSER FÖR STRUKTUR, MEMBRANBINDNING OCH JONKANALBILDNING AV ANNEXIN-FAMILJEN AV PROTEINER
1g5n : BILAGA V KOMPLEX MED HEPARIN OLIGOSACKARIDER
1hak : KRISTALSTRUKTUR AV REKOMBINANT HUMAN PLACENTAL ANNEXIN V KOMPLEXERAD MED K-201 SOM KALCIUMKANAL AKTIVITETSHÄMMARE
1hvd : STRUKTURELL OCH ELEKTROFYSIOLOGISK ANALYS AV MUTANTER AV BILAGA V. MUTAGENES AV HUMAN ANNEXIN V, EN IN VITRO SPÄNNINGSGATAD KALCIUMKANAL, GER INFORMATION OM DE STRUKTURELLA EGENSKAPERNA HOS JONVÄGEN, SPÄNNINGSSENSORN OCH JONSELIVITETSFILTRET
1hve : STRUKTURELL OCH ELEKTROFYSIOLOGISK ANALYS AV MUTANTER AV BILAGA V. MUTAGENES AV HUMAN ANNEXIN V, EN IN VITRO SPÄNNINGSGATAD KALCIUMKANAL, GER INFORMATION OM DE STRUKTURELLA EGENSKAPERNA HOS JONVÄGEN, SPÄNNINGSSENSORN OCH JONSELIVITETSFILTRET
1hvf : STRUKTURELL OCH ELEKTROFYSIOLOGISK ANALYS AV MUTANTER AV BILAGA V. MUTAGENES AV HUMAN ANNEXIN V, EN IN VITRO SPÄNNINGSGATAD KALCIUMKANAL, GER INFORMATION OM DE STRUKTURELLA EGENSKAPERNA HOS JONVÄGEN, SPÄNNINGSSENSORN OCH JONSELIVITETSFILTRET
1hvg : STRUKTURELL OCH ELEKTROFYSIOLOGISK ANALYS AV MUTANTER AV BILAGA V. MUTAGENES AV HUMAN ANNEXIN V, EN IN VITRO SPÄNNINGSGATAD KALCIUMKANAL, GER INFORMATION OM DE STRUKTURELLA EGENSKAPERNA HOS JONVÄGEN, SPÄNNINGSSENSORN OCH JONSELIVITETSFILTRET
1n41 : Kristallstruktur av Annexin V K27E Mutant
1n42 : Kristallstruktur av Annexin V R149E Mutant
1n44 : Kristallstruktur av Annexin V R23E Mutant
1sav : HUMAN BILAGA V MED PROLINE SUBSTITUTION MED TIOPROLINE
2ie6 : Annexin V under 2,0 MPa tryck av xenon
2ie7 : Annexin V under 2,0 MPa tryck av dikväveoxid
2ran : RAT ANNEXIN V KRISTALSTRUKTUR: CA2+-INDUCERADE KONFORMATIONSFÖRÄNDRINGAR