Perls preussisk blå

Cerebrospinalvätskeprov färgat med Perls Prussian blue som visar järn som innehåller makrofager (färgad blå) omgiven av erytrocyter (färgad röd)

Inom histologi , histopatologi och klinisk patologi är Perls Prussian blue en vanlig metod för att upptäcka närvaron av järn i vävnads- eller cellprover. Perls Prussian Blue har fått sitt namn från den tyske patologen Max Perls (1843–1881), som beskrev tekniken 1867. Metoden innebär inte applicering av ett färgämne, utan gör att pigmentet Preussian Blue bildas direkt i vävnaden . Metoden färgar mestadels järn i järntillståndet , vilket inkluderar ferritin och hemosiderin , snarare än järn i järnhaltigt tillstånd.

Används

Sektion av levern färgad med Perls Preussian Blue, som visar järnansamlingar (blått) som överensstämmer med homozygot genetisk hemokromatos

Perls metod används för att indikera "icke- hem " järn i vävnader som ferritin och hemosiderin, proceduren färgar inte järn som är bundet till porfyrinbildande hem som hemoglobin och myoglobin . Färgen är en viktig histokemisk färgning som används för att visa fördelningen och mängden järnavlagringar i levervävnaden, ofta i form av en biopsi. Perls procedur kan användas för att identifiera överskott av järnavlagringar såsom hemosiderinavlagringar ( hemosideros ) och vid tillstånd som ärftlig hemokromatos . Perls Prussian blue används ofta på benmärgsaspirat för att indikera nivåer av järnlagring och kan ge tillförlitliga bevis på järnbrist.

Appliceringsmetod

Perls preussiska blå komponenter: kaliumferrocyanid och saltsyra .

Perls publicerade inte en detaljerad procedur annat än att indikera att en utspädd kaliumferrocyanidlösning applicerades på vävnaden följt av saltsyra . Järnjärnavlagringar i vävnaden (finns mest som järn(III)järn i lagringsproteinet ferritin ) reagerar sedan med den lösliga ferrocyaniden i fläcken för att bilda det olösliga preussiska blåa pigmentet (en komplex hydratiserad järn(III)ferrocyanidsubstans). Dessa avlagringar är sedan mikroskopiskt synliga som blå eller lila avlagringar.

Många metoder för att utföra Perls preussisk blåfärgning för järn har publicerats, Drury och Wallington (1980) ger ett protokoll som använder en blandning av 1 del 2% saltsyra och 1 del 2% kaliumferrocyanid som appliceras på sektionen för 20– 30 minuter följt av en sköljning i destillerat vatten och applicering av en motfärgning som eosin , safranin eller neutralrött .

Verkningssätt

Perls preussisk blåfärgad del av leverbiopsi som visar hemosideros

Kaliumferrocyanid i färgningslösningen kombineras med järnjärnet och bildar det preussiska blå pigmentet. Tillsatsen av saltsyra ökar tillgängligheten av järn i vävnaden för reaktion med kaliumferrocyaniden. Den kemiska reaktionen för omvandlingen av järn till preussiskt blått tillhandahålls enligt följande i Drury och Wallington (1980): 4FeCl ₃ + 3K ₄ Fe(CN) ₆ → Fe4[Fe(CN) ₆ ] ₃ + 12KCl}}

(järn(III)järn) + (kaliumferrocyanid) → (järn(III)ferrocyanid eller preussisk blått)