Papanicolaou fläck

Papanicolaou-färgning som visar en låggradig skvamös intraepitelial lesion (LSIL) från ett Pap-test . Cellkärnor färgade blå.

Papanicolaou-färgning (även Papanicolaous-färgning och Pap-färgning ) är en multikromatisk (flerfärgad) cytologisk färgningsteknik utvecklad av George Papanicolaou 1942. Papanicolaou-färgningen är en av de mest använda färgerna inom cytologi , där den används för att hjälpa patologer att göra en diagnos. Även om det är mest anmärkningsvärt för dess användning vid upptäckt av livmoderhalscancer i Pap-testet eller cellprovet , används det också för att färga icke- gynekologiska provpreparat från en mängd olika kroppssekret och från små nålbiopsier av organ och vävnader. Papanicolaou publicerade tre formuleringar av denna fläck 1942, 1954 och 1960.

Användande

Pap-färgning används för att differentiera celler i utstryksberedningar (där prover sprids eller smetas ut på ett mikroskopobjektglas) från olika kroppssekret och nålbiopsier ; proverna kan inkludera gynekologiska utstryk ( utstryk ), sputum , borstningar, tvättar, urin , likvor , bukvätska, pleuravätska , ledvätska, sädesvätska , fina nålspirationer , tumörberöringsprover eller andra material som innehåller lösa celler.

Pap-färgen är inte helt standardiserad och kommer i flera formuleringar, som skiljer sig åt i de exakta färgämnena som används, deras förhållanden och tidpunkten för processen. Pap-färgning är vanligtvis förknippad med cytopatologi där lösa celler undersöks, men färgen har även modifierats och använts på vävnadsskivor.

Pap-test

Huvudartikel: Pap-test

Pap-färgning används i cellprovet (eller Pap-testet) och är en pålitlig teknik vid screening av livmoderhalscancer inom gynekologi .

Generaliserad färgningsmetod

Den klassiska formen av Papanicolaou-bets innebär fem fläckar i tre lösningar.

• Den första färgningslösningen innehåller hematoxylin som färgar cellkärnor . Papanicolaou använde Harris hematoxylin i alla tre formuleringarna av fläcken han publicerade.
• Den andra färgningslösningen (betecknad OG-6), innehåller Orange G i 95 % etylalkohol med en liten mängd fosfovolframsyra . I OG-6 betecknar OG Orange G och '6' betecknar koncentrationen av tillsatt fosfovolframsyra ; andra varianter är OG-5 och OG-8).
• Den tredje färgningslösningen består av tre färgämnen, Eosin Y , ljusgrön SF gulaktig och Bismarck brun Y i 95 % etylalkohol med en liten mängd fosfovolframsyra och litiumkarbonat . Denna lösning, betecknad EA, följt av ett nummer som anger andelen färgämnen, andra formuleringar inkluderar EA-36, EA-50 och EA-65.

Motfärgerna är upplösta i 95 % etylalkohol som förhindrar att cellerna överfärgas vilket skulle dölja kärndetaljer och cellkonturer, särskilt i fallet när celler överlappar varandra på objektglaset. Fosfovolframsyra tillsätts för att justera pH på motfärger och hjälper till att optimera färgintensiteten. EA-motfärgen innehåller Bismarck-brun och fosfovolframsyra, som i kombination gör att båda faller ut ur lösningen, vilket minskar blandningens livslängd.

Resultat

Färgen bör resultera i celler som är ganska genomskinliga så att även tjockare prover med överlappande celler kan tolkas. Cellkärnor bör vara skarpa, blå till svarta till färgen och kromatinmönstren i kärnan bör vara väldefinierade. Cellcytoplasman färgar blågrönt och keratin färgar orange .

Eosin Y färgar de ytliga skivepitelcellerna , nukleolerna , flimmerhåren och röda blodkroppar . Ljusgrön SF gulaktig ger en blå färgning för cytoplasman av aktiva celler såsom kolumnära celler, parabasala skivepitelceller och intermediära skivepitelceller. Ytliga celler är orange till rosa, och mellanliggande och parabasala celler är turkosgröna till blå.

Ultrasnabb Papanicolaou fläck

Ultrasnabb Papanicolaou-färgning är ett alternativ till finnålsaspirationsproverna, utvecklade för att uppnå jämförbar visuell klarhet på betydligt kortare tid. Processen skiljer sig i rehydrering av det lufttorkade utstryket med saltlösning , använd 4% formaldehyd i 65% etanolfixativ och användning av Richard-Allan Hematoxylin -2 och Cyto-Stain , vilket resulterar i en 90-sekunders process som ger transparenta polykromatiska fläckar .

Exempel på Papanicolaou-färgning

• 

  Malignt melanom , finnålsaspirationsbiopsi av levern , direkt utstryk.

• 

  Skivepitelcancer , bronkial tvätt.

• 

  Papillär sköldkörtelcancer , finnålsaspirationsbiopsi .

• 

  Benignt urincytologiskt prov.

• 

  Skivepitelcancer i livmoderhalsen .

Papper av George N. Papanicolaou som beskriver hans fläck

• Papanicolaou, George N. "En ny procedur för färgning av vaginala utstryk." Science 95.2469 (1942): 438–439.

• Papanicolaou, George N. "Cellutstrykningsmetoden för att diagnostisera cancer." American Journal of Public Health and the Nation's Health 38.2 (1948): 202–205.

• Papanicolaou, George N. "Atlas of exfoliative cytology." Publicerad för samväldesfonden av Harvard University Press. (1954).

• Papanicolaou, George N. "Memorandum om färgning." Atlas av exfoliativ cytologi. Cambridge, MA: Harvard University Press, Supplement II (1960): 12.

Se även

• Diff-Quik — Romanowsky-färgningsmetod som vanligtvis används inom cytologi