PLEKHA7
| PLEKHA7- | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| identifierare | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| , pleckstrin-homologidomän som innehåller | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| externa A7-ID:n | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Wikidata | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
PLEKHA7 (Pleckstrin homologidomän-innehållande familj A-medlem 7) är ett adherens junction (AJ) protein, involverat i junctionens integritet och stabilitet.
Historia
Proteinet upptäcktes i Masatoshi Takeichis labb medan man letade efter potentiella bindningspartners för den N-terminala regionen av p120 . PLEKHA7 identifierades genom masspektrometri i lysat av humana tarmkarcinomceller ( Caco-2 ) i en GST-pull down med användning av N-terminal GST - fusion p120 catenin som bete. Det upptäcktes också oberoende i Sandra Citis grupp som ett protein som interagerar med den klotformade huvuddomänen av Paracingulin i en tvåhybridskärm av jäst . PLEKHA7 lokaliseras vid epitelial zonulära AJs.
Strukturera
Strukturen hos PLEKHA7 kännetecknas av två WW-domäner följt av en Pleckstrin-homologidomän (PH) i den N-terminala regionen. I den C-terminala halvan innehåller proteinet tre coiled coil (CC) domäner och två prolinrika (Pro) domäner. PLEKHA7 har detekterats i olika isoformer på ett vävnadsspecifikt sätt. Två isoformer på 135 kDa och 145 kDa har rapporterats i kolon, lever, lunga, ögon, bukspottkörtel, njure och hjärta. Dessutom har två huvudtranskript på 5,5 kb och 6,5 kb identifierats i hjärna, njure, lever, tunntarm, placenta och lunga, medan endast ett PLEKHA7 mRNA-transkript på 5,5 kb identifieras i hjärta, hjärna, kolon och skelettmuskulatur.
Protein-protein interaktioner
Interaktionsstudier in vitro genomfördes för att kartlägga interaktionen/interaktionerna mellan PLEKHA7 med p120 (rester 538-696), Nezha ( CAMSAP3 ) (rester 680-821), paracingulin (rester 620-769) och Afadin (rester 371) . Proteinet PDZD11 identifierades som ett protein som interagerar genom sin N-terminala region med den N-terminala WW-domänen av PLEKHA7, baserat på 2-hybridscreening och analys av PLEKHA7-immunfällningar Till skillnad från de flesta andra AJ-proteiner, men liknar afadin, är PLEKHA7 exklusivt detekteras i den zonulära apikala delen av AJ, men inte i "puncta adherentia" längs epitelcellernas laterala membran. Cellulär lokalisering och vävnadsfördelning av PLEKHA7 har bekräftats genom immunelektronmikroskopi (Immuno-EM) av vildtyp och slår ner tarmepitelvävnader.
Fungera
Den första identifierade funktionen hos PLEKHA7 var att bidra till integritet och stabilitet hos zonula adherens- övergångarna genom att länka E-cadherin /p120-komplexet till minusändarna av mikrotubuli (MT) genom Nezha (CAMSAP3). PLEKHA7-Nezha-MTs-komplexet tillåter transport av KIFC3 (en motor med minusände) till AJ. Men i Eph4-cellinjen rekryteras PLEKHA7 till E-cadherinbaserad AJ av Afadin, oberoende av p120. PLEKHA7 knockdown-studier i Madin-Darby hundnjure (MDCK)-celler indikerade dess krav på AJ-lokalisering av paracingulin. krävs PLEKHA7-homologen i zebrafisk , Hadp1, för korrekt hjärtfunktion och morfogenes i embryot, vilket reglerar den intracellulära Ca 2+
-dynamiken genom fosfatidylinositol 4-kinas (PIK4)-vägen.
År 2015 upptäckte forskare att PLEKHA7 rekryterar det så kallade mikroprocessorkomplexet (association av Drosha- och DGCR8 -proteiner) till ett tillväxthämmande ställe (apikala zonula adherens ) i epitelceller istället för ställen vid basolaterala områden av cell-cellkontakt som innehåller tyrosin - fosforylerad pl20 och aktiv Src . Förlust av PLEKHA7 stör miRNAs reglering, vilket orsakar tumörframkallande signalering och tillväxt. Att återställa normala miRNA-nivåer i tumörceller kan vända den avvikande signaleringen. 2015 upptäcktes det också att PLEKHA7 har en roll i att kontrollera känsligheten för Staphylococcus aureus alfa-toxin. Celler som saknar PLEKHA7 skadas av toxinet, men återhämtar sig efter förgiftning. Möss knockout för PLEKHA7 är livskraftiga och fertila, och när de infekteras med metycillin-resistenta S. aureus USA300 LAC-stam visar de en minskad sjukdomsgrad vid både hudinfektion och dödlig lunginflammation, vilket identifierar PLEKHA7 som ett potentiellt icke-nödvändigt värdmål för att minska S. aureus virulens under epitelinfektioner.
Under 2016 fann forskare att PLEKHA7 rekryterar det lilla PDZ-proteinet PDZD11 till adherens junctions, vilket resulterar i stabilisering av nektiner vid adherens junctions. Knock-out av PLEKHA7 resulterar i förlust av PDZD11 från epitelial adherens-övergångar, och detta räddas genom införandet av exogent PLEKHA7. De N-terminala 44 resterna av PDZD11 interagerar med den första WW-domänen av PLEKHA7. I frånvaro av antingen PLEKHA7 eller PDZD11, minskar mängden nektin-3 och nektin-4 som detekteras vid korsningar, såväl som totala nektinnivåer, genom proteasommedierad nedbrytning. PDZD11 interagerar direkt med det cytoplasmatiska PDZ-bindande motivet av nektiner, genom sin egen PDZ-domän. Närhetsligeringsanalys visar att PLEKHA7 är associerad med nektiner på ett PDZD11-beroende sätt. Nektiner är den andra huvudklassen av transmembrana adhesionsmolekyler vid adherensövergångar, förutom cadheriner. Därför stabiliserar PLEKHA7 både cadheriner och nektiner vid AJ.
Klinisk signifikans
Genomomfattande associationsstudier tyder på att PLEKHA7 är associerat med blodtryck och hypertoni och primär vinkelstängningsglaukom . Dessutom har ett ökat uttryck av PLEKHA7 i invasiv lobulär bröstcancer rapporterats. I en nyare studie visade sig uttrycket av PLEKHA7-protein i höggradiga duktala bröstkarcinom och lobulära bröstkarcinom vara mycket lågt eller omöjligt att upptäcka genom immunfluorescens eller immunhistokemi, trots upptäckten av PLEKHA7 mRNA En Mayo Clinic-studie publicerad online i augusti 2015 fann att PLEKHA7 är fellokaliserat eller förlorat i nästan alla undersökta bröst- och njurtumörpatientprover.