THP-1-cellinje
THP-1 är en human monocytisk cellinje som härrör från en patient med akut monocytisk leukemi . Det används för att testa leukemicellinjer i immunocytokemisk analys av protein-proteininteraktioner och immunhistokemi .
Egenskaper
Även om THP-1-celler är av samma härstamning, kan mutationer orsaka skillnader när avkomman förökar sig. I allmänhet uppvisar THP-1-celler en stor, rund encellig morfologi. Cellerna härleddes från det perifera blodet från en 1-årig människa med akut monocytisk leukemi. Några av deras egenskaper är:
- Uttryck av Fc-receptor och C3b-receptorer utan att yt- och cytoplasmatiska immunoglobuliner saknas .
- Produktion av IL-1 .
- Positiv detektion av alfa-naftylbutyratesteras och lysozymer
- Fagocytisk fysiologi (både för latexpärlor och sensibiliserade erytrocyter).
- Återställande av svaret från renade T - lymfocyter på Con A.
- Ökad CO 2 -produktion vid fagocytos och differentiering till makrofagliknande celler
- Polarisering till M1-fenotypen genom inkubation med IFN-y och LPS, eller till M2-fenotypen genom inkubation med interleukin 4 och interleukin 13
- Differentiering till omogna dendritiska celler, med användning av rekombinant humant interleukin 4 (rhIL-4) och rekombinant human granulocytmakrofag kolonistimulerande faktor (rhGM-CSF), och mogna dendritiska celler med användning av rhIL-4, rhGM-CSF, rekombinant human tumör-nekrotisk faktor α (rhTNF-a) och jonomycin.
- HLA -typen för THP-1 är HLA-A*02:01; A*24:02; B*15:11; B*35:01; C*03:03; DRB1*01:01; DRB1*15:01; DQB1*05:01; DQB1*06:02; DPB1*02:01; DPB1*04:02 (i den tyska samlingen av mikroorganismer och cellkulturer (DSMZ) cellbank). Denna HLA-typ kan ändras beroende på referensbioförvaret, på grund av förlust av heterozygositet i flera kromosomala regioner, eftersom THP-1 från American Type Culture Collection (ATCC) inte uttrycker HLA-A*24:02 och B*35: 01 alleler.
Tillväxtinformation
THP-1 kan tillhandahålla kontinuerlig odling när den odlas i suspension; RPMI 1640 + 10 % FBS + 2 mM L-glutamin. Den genomsnittliga fördubblingstiden är 19 till 50 timmar. 1 mM natriumpyruvat, penicillin (100 enheter/ml) och streptomycin (100 μg/ml) tillsätts också vanligtvis för att hämma bakteriell kontaminering. Kulturer bör bibehållas vid celltätheter i intervallet 2-9x10 5 celler/ml vid 37 ° C, 5 % CO 2 . Celler är icke-vidhäftande.
Faror
THP-1-celler är av mänskligt ursprung, och inga bevis har hittats för närvaron av infektiösa virus eller toxiska produkter. ATCC Biosäkerhetsrekommendation är nivå 1.
Forskningsansökningar
THP-1-celler används som in vitro- cancercellsmodeller, såväl som som modeller för att studera monocyt-makrofagdifferentieringsprocessen, och som en modell för att undersöka några makrofagrelaterade fysiologiska processer, till exempel makrofagkolesterolutflödet.