Immunfixering
Immunfixering tillåter detektion och typning av monoklonala antikroppar eller immunglobuliner i serum eller urin . Det är av stor betydelse för diagnos och övervakning av vissa blodrelaterade sjukdomar som myelom .
Princip
Metoden detekterar genom utfällning : när ett lösligt antigen (Ag) bringas i kontakt med motsvarande antikropp , sker utfällning, som kan vara synlig med blotta ögat eller mikroskop. [ citat behövs ]
Immunfixering separerar först antikroppar i en blandning som en funktion av deras specifika elektroforetiska rörlighet. I identifieringssyfte används antisera som är specifika för de riktade antikropparna.
Specifikt tillåter immunfixering detektering av monoklonala antikroppar representativa för sjukdomar som myelom eller Waldenström makroglobulinemi .
Metod
Tekniken består av att deponera ett serumprov (eller urin som tidigare har koncentrerats) på en gel. Efter applicering av en elektrisk ström som tillåter separation av proteiner enligt deras storlek, läggs antikroppar specifika för varje typ av immunglobulin på gelén. Det verkar alltså vara mer eller mindre smala band på gelén, som finns vid olika immunglobuliner. [ citat behövs ]
Immunfixering som immunelektrofores, sker i två steg:
- Det första steget är identiskt för båda teknikerna. Den består i att deponera immunglobulinerna som finns i serumet eller urinen på en gel och sedan separera immunglobulinerna enligt deras elektroforetiska rörlighet genom att få dem att migrera under inverkan av ett elektriskt fält. Denna migration beror på massan och laddningen av antigenet. När väl immunoglobulinerna separeras kan vi gå vidare till nästa steg.
- Det andra steget är baserat på den teknik som används. Immunfixering kräver elektrofores för att migrera serumproteiner i replikat. Sedan används specifika anti-immunoglobulinantisera för att behandla varje replikat. För detta placeras inte antisera i en kanal, som vid elektrofores, utan de läggs individuellt till varje migrationsbana. Närvaron av ett monoklonalt immunglobulin resulterar i uppkomsten av ett smalt band efter färgningskomplexutfällningar. Till exempel, i fallet med en IgG-lambda, kommer det att finnas ett smalt band, både på banan som deponerades anti-G och på vilken har deponerats med anti-lambda.
Meriter
Immunfixering tenderar att ersätta proteinelektrofores eftersom: [ citat behövs ]
- det är snabbare (resultat inom tre timmar);
- det är något känsligare. Immunfixering kan avslöja ett immunglobulin som missas av proteinelektrofores, särskilt vid låga koncentrationer (mindre än 1 gram/liter);
- den kan vara delvis automatiserad och kan användas i fler laboratorier;
- det är lättare att läsa och tolka.
Nackdelar
Immunfixering är dock endast känslig för immunglobuliner och är dyrare än proteinelektrofores.
Se även
Källor
externa länkar
- MedlinePlus Encyclopedia : 003543 - "Immunfixering - serum"
- MedlinePlus Encyclopedia : 003593 - "Immunfixering - urin"