Supravital färgning

Supravital fläck av ett utstryk av mänskligt blod från en patient med hemolytisk anemi . Retikulocyterna är cellerna med de mörkblå prickarna och krökta linjära strukturer (reticulum) i cytoplasman.

Supravital färgning är en metod för färgning som används i mikroskopi för att undersöka levande celler som har tagits bort från en organism. Det skiljer sig från intravital färgning, som görs genom att injicera eller på annat sätt föra in fläcken i kroppen. Således kan en supravital fläck ha en större toxicitet , eftersom endast ett fåtal celler behöver överleva den en kort stund. Termen " vital fläck " används av vissa författare för att specifikt hänvisa till en intravital fläck, och av andra utbytbart med en supravital fläck, varvid kärnkonceptet är att cellen som undersöks fortfarande lever. Eftersom cellerna är levande och ofixerade, utanför kroppen, är supravitala fläckar av tillfällig karaktär.

Den vanligaste supravitala färgningen utförs på retikulocyter med nytt metylenblått eller briljant kresylblått , vilket gör det möjligt att se det retikulofilamentösa mönstret av ribosomer som karakteristiskt fälls ut i dessa levande omogna röda blodkroppar av de supravitala fläckarna. Genom att räkna antalet sådana celler kan hastigheten för bildning av röda blodkroppar bestämmas, vilket ger en inblick i benmärgsaktivitet och anemi . Detta är i motsats till livsviktig färgning , när färgämnet som används är ett som är uteslutet från de levande cellerna så att endast döda celler färgas positivt. (Vitala fläckar inkluderar färgämnen som trypanblått och propidiumjodid , som antingen är för skrymmande eller för laddade för att passera cellmembranet, eller som aktivt snabbt pumpas ut av levande celler.)

Supravital färgning kan kombineras med cellyteantikroppsfärgning ( immunfluorescens ) för applikationer som FACS- analys. Immunfluorescens kan också göras i det inre av levande celler genom reversibel cellpermeabilisering med användning av detergenten Triton X-100 . Justerad noggrant till lämplig koncentration för antalet celler, kan förbehandlingen tillåta åtkomst av molekyler mellan 1 och 150 kilodalton till det inre av cellen. Även om antikroppar kan användas på liknande sätt i detta sammanhang, är termen "supravital färg" vanligtvis reserverad för mindre kemikalier som innehar lämpliga egenskaper.

Exempel på vanliga supravitala färgämnen

Supravitala färgämnen för röda blodkroppar:

Hoechst fläck

^ "Engelsk medicinsk ordbok" .
^ N. Chandler Foot (1954). "Vital färgning". Annals of the New York Academy of Sciences . 59 (2): 259–267. doi : 10.1111/j.1749-6632.1954.tb45936.x . PMID 13229212 .
^ John P. Greer; Maxwell Myer Wintrobe (2008). Wintrobes kliniska hematologi . ISBN 9780781765077 .
^ Tina Carlsen; Richard Langlois; Erin Bissell. "Immunoassay/Vital Stain System (IVSS) Proof-of-Concept Slutrapport" (PDF) . Lawrence Livermore National Laboratory.
^ Anne L van de Ven, Karen Adler-Storthz och Rebecca Richards-Kortum (2009). "Leverans av optiska kontrastmedel med hjälp av Triton-X100, del 1: Reversibel permeabilisering av levande celler för intracellulär märkning" . J Biomed Opt . 14 (2): 021012. doi : 10.1117/1.3090448 . PMC 2748244 . PMID 19405725 . {{ citera tidskrift }} : CS1 underhåll: flera namn: lista över författare ( länk )
^ 2011 Hematologi, klinisk mikroskopi och ordlista för kroppsvätskor av CAP

[1] "Engelsk medicinsk ordbok" .

[2] N. Chandler Foot (1954). "Vital färgning". Annals of the New York Academy of Sciences . 59 (2): 259–267. doi : 10.1111/j.1749-6632.1954.tb45936.x . PMID 13229212 .

[3] John P. Greer; Maxwell Myer Wintrobe (2008). Wintrobes kliniska hematologi . ISBN 9780781765077 .

[4] Tina Carlsen; Richard Langlois; Erin Bissell. "Immunoassay/Vital Stain System (IVSS) Proof-of-Concept Slutrapport" (PDF) . Lawrence Livermore National Laboratory.

[5] Anne L van de Ven, Karen Adler-Storthz och Rebecca Richards-Kortum (2009). "Leverans av optiska kontrastmedel med hjälp av Triton-X100, del 1: Reversibel permeabilisering av levande celler för intracellulär märkning" . J Biomed Opt . 14 (2): 021012. doi : 10.1117/1.3090448 . PMC 2748244 . PMID 19405725 . {{ citera tidskrift }} : CS1 underhåll: flera namn: lista över författare ( länk )

[6] 2011 Hematologi, klinisk mikroskopi och ordlista för kroppsvätskor av CAP