Sekretionsanalys
Sekretionsanalys är en process som används inom cellbiologi för att identifiera celler som utsöndrar ett visst protein (vanligtvis ett cytokin ). Det utvecklades först av Manz et al. år 1995.
Vanligtvis isoleras en cell som utsöndrar proteinet av intresse med användning av ett antikropp-antikroppskomplex som täcker cellen och kan "fånga" de utsöndrade molekylerna. Cellen detekteras sedan av en annan fluorokrommärkt antikropp och extraheras därefter med en process som kallas fluorescensaktiverad cellsortering (FACS) . FACS-metoden liknar i stort sett den enzymkopplade immunosorbentanalys ( ELISA ) antikroppsformatet, förutom att de inkapslade cellerna förblir intakta. Detta är fördelaktigt eftersom cellerna fortfarande lever efter att extraktionen har ägt rum.
Ytterligare framsteg gör nu att det är möjligt att extrahera de utsöndrande cellerna med hjälp av ett magnetbaserat separationssystem eller med hjälp av en flödescytometer .
Ett antal kommersiella tillämpningar finns för sekretionsanalys. Ett sådant exempel är teknologin Gel Microdrop (GMD), utvecklad av One Cell Systems. En cell hävdar att GMD typiskt återvinner ett högre antal viabla utsöndrande celler än andra metoder, samtidigt som de ignorerar alla celler som inte utsöndrar det önskade proteinet.
- Manz, Rudolf; et al. (mars 1995). "Analys och sortering av levande celler enligt utsöndrade molekyler, omlokaliserade till en cellyteaffinitetsmatris" . Proceedings of the National Academy of Sciences . 92 (6): 1921–1925. Bibcode : 1995PNAS...92.1921M . doi : 10.1073/pnas.92.6.1921 . PMC 42394 . PMID 7892200 .
Vidare läsning
- Turcanu, Victor; Williams, Neil A. (2001). "Cellidentifiering och isolering på basis av cytokinutsöndring: Ett nytt verktyg för att undersöka immunsvar" . Naturmedicin . 7 (3): 373–376. doi : 10.1038/85533 . PMID 11231640 . S2CID 837840 .
externa länkar
- One Cell Systems - Gel Microdrop (GMD) Secretion Assay-teknologi.