S-tagg
S-tag är namnet på en oligopeptid som härrör från pankreatisk ribonukleas A (RNas A).
Om RNas A spjälkas med subtilisin , spjälkas en enda peptidbindning , men de resulterande två produkterna förblir svagt bundna till varandra och proteinet, kallat ribonukleas S, förblir aktivt även om var och en av de två produkterna ensam inte visar någon enzymatisk aktivitet. N -terminalen av det ursprungliga RNas A, även kallad S-peptid, består av 20 aminosyrarester , av vilka endast de första 15 krävs för ribonukleasaktivitet. Denna 15 aminosyror långa peptid kallas S15 eller S-tag .
Aminosyrasekvensen för S-taggen är: Lys-Glu-Thr-Ala-Ala-Ala-Lys-Phe-Glu-Arg-Gln-His-Met-Asp-Ser . Man tror att peptiden med dess överflöd av laddade och polära rester skulle kunna förbättra lösligheten av proteiner den är fäst vid [ citat behövs ] . Dessutom tros peptiden ensam inte vikas till en distinkt struktur. På DNA-nivå kan S-taggen fästas till N- eller C-terminalen av vilket protein som helst . Efter genuttryck kan ett sådant märkt protein detekteras av kommersiellt tillgängliga antikroppar .
1. RT Raines et al., The S-Tag Fusion System for Protein Purification. Metoder Enzymol. 326, 362-367 (2000)