Raccoonpox virus

Raccoonpox virus
Klassificering av virus
(orankad):	Virus
Rike :	Varidnaviria
Rike:	Bamfordvirae
Provins:	Nucleocytoviricota
Klass:	Pokkesviricetes
Beställa:	Chitovirales
Familj:	Poxviridae
Släkte:	Ortopoxvirus
Arter:	Raccoonpox virus

Raccoonpoxvirus (RCN) är ett dubbelsträngat DNA-virus och en medlem av ortopoxvirusen i familjen Poxviridae och underfamiljen Chordopoxvirinae som består av åtta släkten: Avipoxvirus, Capripoxvirus, Leporipoxvirus, Molluscipoxvirus, Orthopoxvirus, Parapoxvirus, Suipoxvirus och Yanoxvirus är naturligt verbratvirus. värd av Chordopoxvirinae underfamiljvirus. Mer specifikt tvättbjörnar de naturliga värdarna för RCN. RCN isolerades 1961 från de övre luftvägarna hos 2 tvättbjörnar i en grupp av 92 observerbart friska tvättbjörnar ( Procyon lotor ) fångade nära Aberdeen , Maryland .

Av de 92 till synes friska tvättbjörnar som fångades nära Aberdeen, Maryland 1961, hade 22 sera innehållande RCN HA1-antikroppar. Serumen korsreagerade delvis med ett vacciniavirus HA -preparat, vilket tyder på en nära relation mellan virusen. Till skillnad från HA hos andra vaccinialiknande virus korsreagerade HA hos RCN inte med appoxvirus HA. Även om RPV är en nära släkting till vaccinia- och cowpox-virus, är det tillräckligt distinkt för att klassificeras som en ny enhet i vaccinia/variola-undergruppen av poxvirus.

Viral klassificering

RCN är ett dubbelsträngat DNA-virus. Det är ett ortopoxvirus i familjen Poxviridae och underfamiljen Chordopoxvirinae.

Släktforskning/evolution

DNA-sekvenser som kodar för HA för RCN och VV ( vacciniavirus ) stam WR (western reserve) såväl som HA för VV, RCN, VPX (sorkpoxvirus) och SKP (skunk poxvirus) är ganska divergerande. Korshybridiseringar tyder på att HA för RCN, VPX och SKP är separata divergerade och att HA för VV, ECT (ectromeliavirus), VAR (variolavirus) och de flesta andra ortopoxvirus är nära besläktade. Hybridiseringar indikerar också att regulatoriska ortopoxvirussekvenser som flankerar HA ORF är ganska konserverade. RCN-vaccinfyllda beten ökade antikroppar mot pest i båda antigenerna .

I motsats till kända medlemmar av poxvirusgruppen är RCN serologiskt (diagnostisk identifiering av antikroppar i serum ) unik i sin förmåga att korsreagera med ett appoxmedel .

Strukturera

RCN är ett ortopoxvirus . Det är ett höljevirus med tegelformade viriongeometrier . Den har ett linjärt genomiskt arrangemang och monopartit genomisk segmentering. Det är en stor viruspartikel med ett genom på 150 till 300 kbp dsDNA (Ropp). En hårnålsögla finns i vardera änden av genomet. Guanin/Cytosin (GC)-innehållet i genomet är 35 %. Det finns stora regioner inom RCN-virusgenomet som korshybriderar mellan medlemmar av släktet.

Skillnader mellan terminala regionmönster av DNA-restriktionsenzymklyvningar av olika RCN-isolat tyder på att varierad passage har främjat utvecklingen av polymorfismer sedan viruset först isolerades 1961. RCN-tandemupprepningssekvenser som hittades på det terminala Sal1-restriktionsfragmentet visade sig vara olika från varicella- och cowpox-virus, vilket ger ytterligare stöd för påståendet att RCN är ett distinkt virus inom ortopoxvirusen. För att skilja mellan ortopoxvirusarter och stammar av RCN används PCR. Distinktionen dras baserat på sekvenserna som kodar för hemagglutinin (HA)-proteinet.

Genom replikationscykel

Inträde i cellen: Virionet fäster på cellytan när de virala proteinerna kommer i kontakt med värdcellens glykosaminoglykanreceptorer och tas in i cellen genom endocytos. Härifrån måste den komma in i cytoplasman. Replikationen av RCN sker i cytoplasman - aldrig i kärnan.

Replikation och transkription: Replikationen och transkriptionen av det virala genomet sker i cytoplasman. Genomreplikering börjar med att viruskärnan avlägsnas när den kommer i kontakt med plasmamembranet. När det väl är obelagt uttrycks det virala DNA:t och replikering följer. Replikation av RCN-genomet sker genom strängförskjutningsmetoden.

Montering och frisättning: Viral montering sker i cytoplasman. Frisättningen av den mogna viruspartikeln resulterar alltid i lysering av värdcellen.

Modulering av värdprocesser

RCN har en negativ effekt på värdcellens mRNA- syntes.

Identifiering

RCN isolerad från 2 av 92 tvättbjörnar i Maryland, föreslog att vara ett ortopoxvirus när det noterades att ett RCN- hemagglutininpreparat reagerade med VV (vacciniavirus) hyperimmun kaninserum. Det rapporterades dock senare att sera från 22 av tvättbjörnarna reagerade starkt med ett RCN-hemagglutininpreparat, men hemagglutininpreparat av VV eller appoxvirus (MPV) visade liten eller ingen korsreaktivitet.

Identifiera via agglutination med kardiolipinkänsliga kycklingerytrocyter .

Associerad sjukdom

RCN-infekterade stam 143 humana osteosarkomceller producerar inklusioner av cytoplasmatisk A-typ (ATI) där ett antal mogna virioner lagras för att upprätthålla viral smittsamhet även om cellen lyser.

Patogenes

Cellinjer infekterade med RCN, Volepox-virus (VPX) eller skunkpoxvirus (SKP) och andra ortopoxvirus som alla är HAD+ (hemagglutinerande virus baserade på vidhäftning till erytrocyter till infekterade celler), bildar stora syncytier (flerkärniga celler som kan resultera från fusion av ennukleära celler), tyder på att, konformationellt, distinkt funktionell HA påverkar polykaryocytos (fusionsprocess).

RCN har cytopatiska effekter (CPE) i apa njurvävnadskulturer (MKTC). Ses på 11 timmars inkubationsdag, kännetecknad av avrundning och granulärt utseende av celler. När RCN inokulerades på korioallantoisk membran (CAM) av 12-dagars embryonerade hönsägg, producerade RCN många små diskreta inbäddade poxor.

Tropism

Tvättbjörnspoxvirus har visat sig infektera stam 143 humana osteosarkomceller som odlats i monolagerkultur, vilket producerar inneslutningar av A-typ i cytoplasman, vilket är typiskt för poxvirus i senare multiplikationscykler.

Hittills kan de flesta orala vacciner inte motstå matsmältningskanalen eller framkalla inte starkt slemhinneimmunsvar. Poxvirus är goda kandidater för utveckling av vacciner mot vilda djur. De infekterar slemhinnevävnad och behåller stabilitet när de störs av miljön.

Använda sig av

RCN har utvecklats som en rekombinant för leverans av vacciner mot pesten (orsakad av bakterien Yersinia pestis ), felint panleukopeniavirus , rabiesvirus och andra patogener i vilda djur och husdjur. Att kontrollera sjukdomar som pesten hos vilda djur och husdjur är viktigt för att minska överföringen till människor.

RCN är gynnad som en vektor för vilda djur och veterinärvård framför andra potentiella poxvirusvektorer eftersom det utlöser ett immunsvar när det tas in genom slemhinnevägar, vilket är viktigt för den utbredda immuniseringen av vilda djur. Rekombinanta RCN (rRCN) vacciner har getts till ett antal däggdjursarter såsom möss, tvättbjörnar, katter och får utan biverkningar. Det rekombinanta vaccinet för rRCN-rabiesvirusglykoprotein var effektivt när det gavs till får både intradermalt och intramuskulärt. Lyckligtvis gjorde rRCN-vaccinet relativt liten skada på fåren när det intas oralt, vilket tyder på att rRCN-vacciner som används för förvaltning av vilda djur och levereras som orala beten skulle vara säkra om de av misstag intas av får. Ytterligare studier behövs för att fastställa effekten av intag av oralt bete rRCN-vaccin av icke-målgårds- och husdjur. Särskilda rRCN-vacciner har utformats för att effektivt ge skyddande immunitet mot flera patogener. rRCN-vacciner har också varit framgångsrika vid behandling av rabiesvirus hos möss. Dessa vacciner fungerade genom att antingen uttrycka rabiesvirusets interna strukturella nukleoprotein (RCN-N) eller genom att uttrycka rabiesvirusglykoproteinet (RCN-G).

RCN, och alla poxviridae-virus, är särskilt användbara för att skapa vacciner eftersom de skapar kostnadseffektiva, stabila, multivalenta vacciner som är lätta att tillverka och kan administreras på flera sätt. Man tror att RCN-vaccination utlöser verkan från både det humorala och cellmedierade immunsvaret och att denna immunitet är långvarig efter endast en vaccination.

Poxvirus-rekombinanta vektorer har implementerats för att framgångsrikt vaccinera mot heterologa bakteriella, virala och parasitära patogener vid användning i djur (t.ex. tvättbjörnar) och människor.

Användning inom veterinärmedicin: har potentiell användning för denna behandlingsteknik vid infektionssjukdomar, ex vivo-terapier och cancerimmunterapi. *Under kliniska prövningar samt viss licensierad kommersialisering vid tidpunkten för publicering.

RCN-virusvektorer har potential att ersätta dyra och arbetsintensiva bekämpningsmedelstillämpningar för att förebygga sjukdomar.

Rekombinant RCN-vaccin främjar effektiv immunitet mot pest (Y. pestis) via den orala vägen, skulle kunna ge ett praktiskt, alternativt tillvägagångssätt, även om mer arbete krävs för att bestämma tidpunkten för vaccinet, varaktigheten av immuniteten som tillhandahålls och effekterna på djur som inte är måltavlor. .

RCN-rekombinanter som uttrycker rabiesvirusglykoprotein eller nukleoprotein skapades. Främja rabiesvirusneutraliserande antikroppar hos tvättbjörnar , hundar , bomullsråttor , kaniner , bobcats och rävar ; ibland i dödliga doser.

RCN används som ett oralt tillförselsystem för fraktion 1 (F1) kapselantigen av Y.pestis. (ersättning av tymidinkinas (TK)). RCN var framgångsrik hos 50 % av de frivilliga deltagarna så att de kunde överleva efterföljande utmaningar. RCN-vektorat vaccin med LcrV (V)-genen, som också kan ge skydd mot Y. pestis.