CD4+ T-celler och antitumörimmunitet

Förståelsen av antitumörimmuniteten hos CD4 ⁺ T-celler har vuxit avsevärt sedan slutet av 1990-talet. CD4 ⁺ T-celler (mogna T-hjälparceller ) spelar en viktig roll för att modulera immunsvar mot patogener och tumörceller och är viktiga för att orkestrera övergripande immunsvar.

Immunövervakning och immunredigering

Denna upptäckt främjade utvecklingen av en tidigare hypotes teori, immunövervakningsteorin. Immunövervakningsteorin antyder att immunsystemet rutinmässigt patrullerar kroppens celler, och när det identifierar en cell, eller grupp av celler, som har blivit cancer , kommer det att försöka förstöra dem och på så sätt förhindra tillväxten av vissa tumörer . (Burnet, 1970) Nyare bevis har föreslagit att immunövervakning bara är en del av en större roll som immunsystemet spelar i kampen mot cancer. Ommodellering av denna teori har lett till utvecklingen av immunredigeringsteorin, där det finns 3 faser, Elimination , Equilibrium och Escape .

Elimineringsfas

Som nämnts är elimineringsfasen synonymt med den klassiska immunövervakningsteorin.

År 2001 visades det att möss med brist på RAG-2 (Recombinase Activator Gene 2) var mycket mindre kapabla att förhindra MCA- inducerade tumörer än vildtypsmöss. (Shankaran et al., 2001, Bui och Schreiber, 2007) RAG-proteiner är nödvändiga för de rekombinationshändelser som är nödvändiga för att producera TCR och Ig, och som sådana är RAG-2-bristade möss oförmögna att producera funktionella T-, B- eller NK-celler . RAG-2-brist möss valdes framför andra metoder för att inducera immunbrist (som SCID-möss) eftersom frånvaro av dessa proteiner inte påverkar DNA-reparationsmekanismer, vilket blir viktigt när man hanterar cancer, eftersom DNA -reparationsproblem kan leda till cancer i sig. Detta experiment ger tydliga bevis för att immunsystemet faktiskt spelar en roll för att utrota tumörceller. ^{[ citat behövs ]}

Ytterligare knock-out-experiment visade viktiga roller för αβ T-celler, γδ T-celler och NK-celler i tumörimmunitet (Girardi et al. 2001, Smyth et al., 2001)

Ett annat experiment som involverade interferon gamma (IFNγ ^−/− ) visade att dessa möss är mer benägna att utveckla vissa typer av cancer också, och antyder en roll för CD4 ⁺ T-celler i tumörimmunitet , som producerar stora mängder IFNγ (Street et al. ., 2002)

perforin visade sig också ha en minskad förmåga att avvärja MCA-inducerad cancer, vilket tyder på en viktig roll för CD8+ ^T -celler. (Street et al. 2001) Perforin är ett protein som produceras av CD8 ⁺ T-celler, som spelar en central roll i de cytotoxiska dödande mekanismerna genom att tillhandahålla inträde av nedbrytande granzymer i en infekterad cell. (Abbas och Lichtman, 2005)

Slutligen har det medfödda immunsystemet också associerats med immunövervakning (Dunn et al., 2004).

Jämviktsfas

Jämviktsfasen av immunredigeringsteorin kännetecknas av tumörens fortsatta existens, men liten tillväxt. På grund av den extremt höga mutationsfrekvensen av cancerceller är det troligt att många kommer att fly undan elimineringsfasen och gå in i jämviktsfasen. Det finns för närvarande få bevis som stöder förekomsten av en jämviktsfas, bortsett från observationen att cancer har visat sig ligga vilande, dvs gå i remission, i en persons kropp i flera år innan de återuppstår igen i den sista flyktfasen. Det har noterats att tumörer som kvarstår i jämviktsfasen uppvisar minskad immunogenicitet jämfört med tumörer som har odlats i immunbristande möss (Shankaran et al., 2001) Tre möjliga utfall för tumörer som lyckas undvika immunsystemet och nå jämvikten fas har föreslagits: 1) eventuell eliminering av immunsystemet 2) en förlängd eller obestämd period av vila , eller 3) progression till den sista flyktfasen. ^{[ citat behövs ]}

Flyktfas

Som namnet antyder kännetecknas flyktfasen av en minskad immunogenicitet hos cancercellerna , deras efterföljande undanflykt från immunsystemet och deras förmåga att kliniskt detekteras. Ett antal teorier har föreslagits för att förklara denna fas av teorin.

Cancerceller, genom mutation , kan faktiskt ha mutationer i några av de proteiner som är involverade i antigenpresentation , och som sådan undviker ett immunsvar. (Dunn et al., 2004) Tumörceller kan, genom mutationer, ofta börja producera stora mängder hämmande cytokiner IL-10, eller transformera tillväxtfaktor β (TGF-β) (Khong och Restifo, 2002) och därigenom undertrycka immunsystemet, möjliggör storskalig spridning (Salazar-Onfray et al., 2007). Det har också observerats att vissa cancerpatienter uppvisar högre än normala nivåer av CD4 ⁺ /CD25 ⁺ T-celler, en undergrupp av T-celler som ofta kallas regulatoriska T-celler , för sina kända immunsuppressiva verkan. Dessa T-celler producerar höga nivåer av IL-10 och TGF-p, och undertrycker därigenom immunsystemet och möjliggör flykt från tumören (Shimizu et al., 1999).

Tumörantigener

Tumörantigener är de som uttrycks av tumörceller och kan kännas igen som olika från självceller. De flesta för närvarande klassificerade tumörantigener syntetiseras endogent och presenteras som sådana på MHC klass I-molekyler till CD8 ⁺ T-celler. Sådana antigener inkluderar produkter av onkogener eller tumörsuppressorgener, mutanter av andra cellulära gener, produkter av gener som normalt tystas, överuttryckta genprodukter, produkter av onkogena virus, onkofetala antigener (proteiner som normalt uttrycks endast under fostrets utveckling) glykolipider och glykoproteiner . Detaljerade förklaringar av dessa tumörantigener finns i Abbas och Lichtman, 2005. MHC klass II-begränsade antigener förblir för närvarande något oklara. Utveckling av nya tekniker har varit framgångsrika för att identifiera några av dessa antigener, men ytterligare forskning krävs. (Wang, 2003)

Antitumör immunitet

CD8 ^{+ T-cellers} roll i antitumörimmunitet snarare än till CD4 ⁺ T-celler. Detta kan hänföras till ett antal saker; CD4 ⁺ T-celler svarar endast på presentation av antigener av MHC klass II, men de flesta celler uttrycker endast MHC klass I; för det andra kan CD8 ⁺ T-celler, när de presenteras med antigen av MHC klass I, direkt döda cancercellen, genom mekanismer som inte kommer att diskuteras i denna artikel, men som har kategoriserats väl; (Se Abbas och Lichtman, 2005) Slutligen finns det helt enkelt en mer utbredd förståelse och kunskap om MHC klass I-tumörantigener, medan MHC klass II-antigener förblir något oklara. (Pardol och Toplain, 1998).

Man trodde att CD4 ⁺ T-celler inte var direkt involverade i antitumörimmunitet, utan snarare fungerade helt enkelt i priming av CD8 ⁺ T-celler, genom aktivering av antigenpresenterande celler (APC) och ökad antigenpresentation på MHC klass I, också som utsöndring av excitatoriska cytokiner såsom IL-2 (Pardol och Toplain, 1998, Kalams och Walker, 1998, Wang 2001).

Kontroversiell roll i antitumörimmunitet

Rollen för CD4 ⁺ T-celler i antitumörimmunitet är kontroversiell. Det föreslogs att CD4 ⁺ T-celler kan ha en direkt roll i antitumörimmunitet genom direkt igenkänning av tumörantigener som presenteras på ytan av tumörceller i samband med MHC klass II-molekyler. Det bör noteras att resultat från nyare rapporter tyder på att direkt igenkänning av tumörer från tumörantigenspecifika CD4 ⁺ T-celler kanske inte alltid är fördelaktigt. Till exempel visades det nyligen att CD4 ⁺ T-celler primärt producerar TNF efter igenkänning av tumörantigener i melanom . TNF kan i sin tur öka lokal immunsuppression och försämra effektorfunktionerna hos CD8 T-celler (Donia M. et al., 2015).

Th 1 och Th ₂ CD4 ⁺ T- _celler

Samma serie experiment, som undersökte rollen för CD4 ⁺ -celler, visade att höga nivåer av IL-4 och IFNy var närvarande vid tumörstället, efter vaccination och efterföljande tumörutmaning. (Hung, 1998) IL-4 är den dominerande cytokinen som produceras av Th ₂ -celler, medan IFNy är den dominerande Th ₁ -cytokinen. Tidigare arbete har visat att dessa två cytokiner hämmar produktionen av varandra genom att hämma differentiering längs den motsatta T _h -vägen, vid normala mikrobiella infektioner (Abbas och Lichtman, 2005), men här sågs de på nästan lika nivåer. Ännu mer intressant var det faktum att båda dessa cytokiner krävdes för maximal tumörimmunitet, och att möss med brist på båda visade kraftigt reducerad antitumörimmunitet. IFN-y nollmöss visade praktiskt taget ingen immunitet, medan IL-4 nollmöss visade en 50% minskning jämfört med immuniserade vildtypsmöss .

Minskningen av immunitet hos möss med brist på IL-4 har tillskrivits en minskning av eosinofilproduktionen . Hos möss med brist på IL-5, cytokinet som är ansvarigt för differentiering av myeloida stamceller till eosinofiler, ses mindre eosinofiler på platsen för tumörutmaning, vilket är att förvänta. (Hung, 1998) Dessa möss uppvisar också minskad antitumörimmunitet, vilket tyder på att möss med brist på IL-4, som skulle producera mindre IL-5 och därefter har minskade eosinofilnivåer, framkallar sin effekt genom eosinofiler.

Th _- 1-aktivitet vid tumörimmunitet

Th 1 _- celler är en av de två huvudsakliga Th- _{cellpolarisationer} som först identifierades. Th 1-differentiering är IL-12- beroende, och IFN-y är signaturcytokinen hos celler av en Th ₁_- linje.

Th 1 _- cells antitumöraktivitet är komplex och inkluderar många mekanismer. Th 1-celler är indirekt ansvariga för att aktivera tumörhämmande CTL genom att aktivera de antigenpresenterande cellerna som sedan presenterar antigen för och aktiverar CTL _.

IFN-y producerad av Th ₁ -celler aktiverar makrofager, vilket ökar fagocytos av patogen- och tumörceller. Aktiverade makrofager producerar IL-12, och eftersom IL-12 främjar Th ₁ -celldifferentiering, bildar detta en tumörundertryckande återkopplingsloop.

Th 1- och NK-celler bidrar båda till att döda tumörceller via den TNF-relaterade apoptosinducerande ligand ₍ TRAIL) vägen. NK-celler producerar IFN-y och aktiveras också av IL-12, vilket skapar en annan tumörundertryckande återkopplingsslinga.

Th _- 2-aktivitet vid tumörimmunitet

Th2 _- celler är den andra Th- _{cellpolarisationen} som initialt definieras. Th2 _- differentiering är beroende av närvaron av IL-4 och frånvaron av IL-12, och signaturcytokiner från Th2- _celler inkluderar IL-4, IL-5 och IL-13 .

Th2 _- medierad antitumöraktivitet involverar primärt rekrytering av eosinofiler till tumörmiljön via IL-4 och IL-13. Anti-tumör eosinofil aktivitet inkluderar attraktion av tumörspecifika CTL, aktivering av makrofager och vaskularisering av tumörstroma.

Emellertid har Th2 _- polarisering som kvantifierats genom IL-5-produktion associerats med tumörproliferation, vilket komplicerar rollen för Th2- _celler i tumörimmunitet.

Th _- 17-aktivitet vid tumörimmunitet

Th 17 är en nyligen identifierad undergrupp av Th- _celler som primärt är involverade i att främja inflammatoriska svar _. Th17 _- differentiering induceras av TGF-p och IL-6 , och signaturcytokiner från Th17 _- celler inkluderar IL-17A och IL-17F .

Mekanismerna för Th ₁₇ -cellaktivitet i tumörmikromiljön är inte väl förstådda. Th _- celler kan orkestrera kroniska inflammatoriska svar, som tenderar att främja tumörtillväxt och överlevnad. Dessutom har vissa tumörer visat sig uttrycka höga nivåer av IL-6 & TGF-β, vilket skulle förstärka en Th ₁₇ -polarisering, vilket skapar en tumörfrämjande återkopplingsslinga.

Th 17-celler har också visat sig ha förmågan att differentiera till IFN-y-utsöndrande celler, och därmed undertrycka tumörtillväxt via IFN-y-relaterade vägar _.

Treg-aktivitet i tumörimmunitet

Regulatoriska Th _- celler (Tregs) är en annan nyligen definierad undergrupp av Th- _celler . Deras huvudsakliga funktioner innebär att upprätthålla självtolerans och immunhomeostas. Treg-differentiering induceras av uttryck av FoxP3-transkriptionsfaktor, och Tregs utsöndrar en mängd olika immunsuppressiva cytokiner , såsom TGF-β . Tregs är skadliga för antitumörimmunsvar, eftersom utsöndringen av TGF-β och andra suppressiva cytokiner dämpar immuniteten från CTL, Th- _celler och APC.

IFN-y

Ett antal mekanismer har föreslagits för att förklara rollen av IFN-y i antitumörimmunitet. I kombination med TNF (Tumor Necrosis Factors) kan IFN-y ha direkta cytotoxiska effekter på tumörceller (Franzen et al., 1986). Ökat MHC-uttryck, som ett direkt resultat av ökad IFN-y-utsöndring, kan resultera i ökad presentation till T-celler. (Abbas och Lichtman, 2005) Det har också visat sig vara involverat i uttrycket av iNOS såväl som ROIs.

iNOS ( inducerbar kväveoxidsyntas ) är ett enzym som ansvarar för produktionen av NO, en viktig molekyl som används av makrofager för att döda infekterade celler. (Abbas och Lichtman, 2005) En minskning av nivåerna av iNOS, (som ses genom immunhistokemisk färgning ) har observerats i IFNγ ^-/− möss även om nivåerna av makrofager på platsen för tumörutmaningen liknar vildtypsmöss. INOS ^-/− möss visar också minskad immunitet, vilket indikerar en direkt roll för CD4 ⁺ -stimulerad iNOS produktion i skydd mot tumörer. (Hung et al., 1998) Liknande resultat har setts hos knockoutmöss som saknar gp91phox, ett protein som är involverat i produktionen av ROI (Reactive Oxygen Intermediates) som också är ett viktigt vapen som används av makrofager för att framkalla celldöd .

År 2000 visade Qin och Blankenstein att IFNγ-produktion var nödvändig för CD4 ⁺ T-cellsmedierad antitumörimmunitet. En serie experiment visade att det var väsentligt för icke-hematopoetiska celler på platsen för utmaningen att uttrycka funktionella IFNy-receptorer. Ytterligare experiment visade att IFN-y var ansvarig för hämning av tumörinducerad angiogenes och kunde förhindra tumörtillväxt genom denna metod. (Qin och Blankenstein, 2000)

MHC klass II och immunterapi

Många av de tidigare nämnda mekanismerna genom vilka CD4 ⁺ -celler spelar en roll i tumörimmunitet är beroende av fagocytos av tumörer av APC och efterföljande presentation på MHC klass II. Det är sällsynt att tumörceller uttrycker tillräckligt med MHC klass II för att direkt aktivera en CD4 ⁺ T-cell. Som sådan har minst två tillvägagångssätt undersökts för att förbättra aktiveringen av CD4 ⁺ T-celler. Det enklaste tillvägagångssättet involverar uppreglering av adhesionsmolekyler, vilket förlänger presentationen av antigener av APC. (Chamuleau et al., 2006) Ett andra tillvägagångssätt innebär att öka uttrycket av MHC klass II i tumörceller. Denna teknik har inte använts in vivo , utan involverar snarare injektion av tumörceller som har transfekterats för att uttrycka MHC klass II-molekyler, förutom suppression av den invarianta kedjan (Ii, se nedan) genom antisensteknologi. (Qiu, 1999) Möss vaccinerade med bestrålade stammar av dessa celler visar ett större immunsvar på efterföljande utmaning av samma tumör, utan uppreglering av MHC klass II, sedan vaccinerade möss med bestrålade, men annars oförändrade tumörceller. Dessa fynd betecknar ett lovande område för framtida forskning inom utvecklingen av cancervacciner.

MHC klass I och klass II vägar

Nedregleringen av den invarianta kedjan (Ii) blir viktig när man överväger de två vägar genom vilka antigener presenteras av celler. De flesta igenkända tumörantigener är endogent producerade, förändrade genprodukter från muterade celler. Dessa antigener presenteras emellertid normalt endast av MHC klass I-molekyler, till CD8 ⁺ T-celler, och uttrycks inte på cellytan bunden till MHC klass II-molekyler, vilket krävs för presentation till CD4 ⁺ T-celler. Forskning har visat att de två vägarna genom vilka antigener presenteras korsar i endoplasmatiska retikulum , där MHC klass I, MHC klass II och endogent syntetiserade antigena proteiner alla är närvarande. Dessa antigenproteiner hindras från att binda till MHC klass II-molekyler av ett protein känt som den invarianta kedjan eller Ii, som i en normal cell förblir bunden till MHC klass II-molekylen tills det lämnar akuten. Nedreglering av denna Ii, med användning av antisense- teknologi, har gett lovande resultat genom att tillåta MHC klass I-tumörantigener att uttryckas på MHC klass II-molekyler vid cellytan (Qui, 1999).

Uppreglering av MHC klass II

På grund av den extremt polymorfa naturen hos MHC klass II-molekyler ger enkel transfektion av dessa proteiner inte en praktisk metod för användning som ett cancervaccin. (Chamuleau et al., 2006) Alternativt har två andra metoder undersökts för att uppreglera uttrycket av dessa proteiner på MHC klass II- ^celler . Den första är behandling med IFNγ, vilket kan leda till ökat uttryck av MHC klass II. (Trincheiri och Perussia, 1985, Fransen L, 1986) Ett andra, mer effektivt tillvägagångssätt involverar inriktning på generna som är ansvariga för syntesen av dessa proteiner, CIITA- eller klass II-transkriptionsaktivatorn. Selektiv geninriktning av CIITA har använts ex vivo för att tillåta MHC klass II ^- celler att bli MHC klass II ⁺ (Xu, et al. 2000). uppreglering av CIITA orsakar också ett ökat uttryck av Ii och måste som sådan användas tillsammans med de antisenstekniker som hänvisats till tidigare (Qui, 1999). I vissa former av cancer, såsom akut myeloid leukemi (AML) kan cellerna redan vara MHC klass II ⁺ , men på grund av mutation uttrycker de låga nivåer på ytan. Man tror att låga nivåer ses som ett direkt resultat av metylering av CIITA-promotorgener (Morimoto et al., 2004, Chamuleau et al., 2006) och att demetylering av dessa promotorer kan återställa MHC klass II-uttryck (Chamuleau et al. ., 2006).

Abbas, AK och Lichtman, 2005. AHCellulär och molekylär immunologi. Elsevier Saunders, Philadelphia.
Bui, Jack D. och Schreiber, Robert R., 2001. Cancerimmunövervakning, immunredigering och inflammation: oberoende eller oberoende process? Current Opinion in Immunology 19 , s. 203–208
Burnet, FM, 1970. Begreppet immunologisk övervakning. Prog. Exp. Tumör Res. 13 , s. 1–27
Chamuleau, M., Ossenkopple, G. och Loosdrecht, A., 2006. MHC klass II-molekyler i tumörimmunologi: prognostisk markör och mål för immunmodulering. Immunobiology 211:6-8 , sid. 616-225.
Donia, M. et al., 2015. Avvikande uttryck av MHC klass II i melanom attraherar inflammatoriska tumörspecifika CD4+ T-celler som dämpar CD8+ T-cells antitumörreaktivitet. Cancer Res 75(18):3747-59 , doi: 10.1158/0008-5472.CAN-14-2956
Dranoff, G., Jaffee, E., Lazenby, A., Golumbek, P., Levitsky, H., Brose, K., Jackson, V., Hamada, H., Pardoll, D. och Mulligan, R., 1993. Vaccination med bestrålade tumörceller konstruerade för att utsöndra murin granulocyt-makrofagkolonistimulerande faktor stimulerar potent, specifik och långvarig antitumörimmunitet. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 , s. 3539–3543.
Dunn, Gavin P., Old, Lloyd J. och Schreiber, Robert D., 2004. Immunobiologin för cancerimmunövervakning och immunredigering. Immunitet 21:2 , s. 137–148
Fransen, L., Van der Heyden, J., Ruysschaert, R och Fiers, W., 1986 Rekombinant tumörnekrosfaktor: dess effekt och dess synergism med interferon-gamma på en mängd normala och transformerade humana cellinjer. Eur. J. Cancer Clin. Oncol. 22 , s. 419–426.
Girardi, M., Oppenheim, DE, Steele, CR, Lewis, JM, Glusac, E., Filler, R., Hobby, P., Sutton, B., Tigelaar, RE och Hayday, AC, 2001. Reglering av kutan malignitet av γδ T-celler. Science 294 , s. 605–609 doi : 10.1126/science.1063916
Hung, K et al., 1998. CD4+ T-cellers centrala roll i antitumörimmunsvaret. J. Exp. Med. 188 , s. 2357–2368.
Kalams, Spyros A. och Walker, Bruce D., 1998. Det kritiska behovet av CD4-hjälp för att upprätthålla effektiva cytotoxiska T-lymfocytsvar. J. Exp. Med. 188:12 , s. 2199–2204.
Khong, HT och Restifo, NP, 2002. Naturligt urval av tumörvarianter i genereringen av "tumörflykt"-fenotyper. Nat. Immunol. 3 , s. 999-1005.
Morimoto et al., 2004 Y. Morimoto, M. Toyota, A. Satoh, M. Murai, H. Mita, H. Suzuki, Y. Takamura, H. Ikeda, T. Ishida, N. Sato, T. Tokino och K. Imai, Inaktivering av klass II-transaktivator genom DNA-metylering och histondeacetylering associerad med frånvaro av HLA-DR-induktion av interferon-gamma i hematopoetiska tumörceller. Br. J. Cancer 90, s. 844–852.
Old, LJ och Boyse, EA, 1964. Immunologi av experimentella tumörer. Annu. Rev. Med. 15 , s. 167–186.
Pardoll, Drew M och Toplain, Suzanne L., 1998. Rollen av CD4+ T-cellsvar i antitumörimmunitet. Current Opinion in Immunology 10 , s. 588–594
Qin, Z och Blankenstein, T., 2000. CD4+ T-cellsmedierad tumöravstötning involverar hämning av angiogenes som är beroende av IFNy-receptoruttryck på icke-hematopoetiska celler. Immunity 12:6 , s. 677–686
Qiu et al., 1999 G. Qiu, J. Goodchild, RE Humphreys och M. Xu, Cancerimmunterapi genom antisensundertryckning av Ii-protein i MHC-klass-II-positiva tumörceller. Cancer Immunol. Immunother. 48 , s. 499–506
Salazar-Onfray, Flavio., López, Mercedes N. och Mendoza-Naranjo, Ariadna., 2007. Paradoxala effekter av cytokiner vid tumörimmunövervakning och tumörimmunflykt. Cytokine and Growth Factor Reviews 18, s. 171–182
Shimizu, J., Yamazaki, S. och Sakaguchi, S., 1999. Induktion av tumörimmunitet genom att avlägsna CD25+CD4+ T-celler: en gemensam grund mellan tumörimmunitet och autoimmunitet. J. Immunol. 163 , s. 5211-5218.
Shankaran, V., Ikeda, H., Bruce, AT, White, JM, Swanson, PE, Old, LJ och Schreiber, RD, 2001. IFNγ och lymfocyter förhindrar primär tumörutveckling och formar tumörimmunogenicitet. Nature 410 , s. 1107–1111.
Smyth, MJ, Crowe, NY och Godfrey, DI, 2001. NK-celler och NKT-celler samarbetar i värdskydd från metylcholantren-inducerat fibrosarkom. Int. Immunol. 13 , s. 459–463
Street, SE, Cretney, E. och Smyth, MJ, 2001. Perforin- och interferon-γ-aktiviteter kontrollerar oberoende tumörinitiering, tillväxt och metastasering. Blood 97 , s. 192–197.
Street, SE, Trapani, JA, MacGregor, D. och Smyth, MJ, 2002. Undertryckande av lymfom och epitelmaligniteter som påverkas av interferon γ. J. Exp. Med. 196 , s. 129–134.
Trinchieri, G. och Perussia, B., 1985. Immuninterferon: en pleiotropisk lymfokin med flera effekter. Immunology Today 6:4 , s. 131–136
Wang, Rong-Fu., 2001. Rollen av MHC klass II-begränsade tumörantigener och CD4+ T-celler i antitumörimmunitet. Trends in Immunology 22:5 , s. 269–276
Wang, Rong-Fu., 2003. Identifiering av MHC klass II-begränsade tumörantigener som känns igen av CD4+ T-celler. Metoder 29:3 , s. 227–235
Xu, M., Qiu, G., Jiang, Z., Hofe, E. och Humphreys, R., 2000. Genetisk modulering av tumörantigenpresentation. Methods in Biotechnology 18:4 , s. 167–172