Uttryckskloning

Expressionskloning är en teknik inom DNA-kloning som använder expressionsvektorer för att generera ett bibliotek av kloner, där varje klon uttrycker ett protein . Detta uttrycksbibliotek screenas sedan för egenskapen av intresse och kloner av intresse återvinns för ytterligare analys. Ett exempel skulle vara att använda ett uttrycksbibliotek för att isolera gener som kan ge antibiotikaresistens .

Uttrycksvektorer

Expressionsvektorer är en specialiserad typ av kloningsvektor i vilken de transkriptions- och translationssignaler som behövs för regleringen av genen av intresse ingår i kloningsvektorn. De transkriptionella och translationella signalerna kan skapas syntetiskt för att göra uttrycket av genen av intresse lättare att reglera.

Syfte

Vanligtvis är det yttersta syftet med uttryckskloning att producera stora mängder specifika proteiner . För detta ändamål kan en bakteriell expressionsklon inkludera ett ribosombindningsställe ( Shine-Dalgarno-sekvens ) för att förbättra translation av genen av intresses mRNA, en transkriptionstermineringssekvens , eller , i eukaryoter , specifika sekvenser för att främja posttranslationell modifiering av proteinprodukten.

Se även