Fransk tryckcellspress
Den franska tryckcellspressen , eller fransk press , är en apparat som används i biologiska experiment för att störa cellers plasmamembran genom att passera dem genom en smal ventil under högt tryck. French Press kan också användas för sönderdelning av kloroplaster, homogenat av djurvävnad och andra biologiska partiklar. Den kan störa cellväggarna samtidigt som den lämnar cellkärnan ostörd. Den franska pressen uppfanns av Charles Stacy French från Carnegie Institution of Washington . Pressen använder en extern hydraulisk pump för att driva en kolv i en större cylinder som innehåller vätskeprovet. Det högtryckssatta provet pressas sedan förbi en nålventil . När provet passerar genom ventilen utsätts vätskan för skjuvspänning och dekompression , vilket orsakar cellulär störning. Huvudkomponenterna i en fransk press är gjorda av rostfritt stål för att förhindra provkontamination.
En fransk press används vanligtvis för att bryta det elastiska plasmamembranet och cellväggarna hos bakterier och andra mikroorganismer för isolering av proteiner och andra cellulära komponenter. Avbrottet av celler i en fransk press genererar "inifrån och ut" membranvesiklar som krävs för många in vitro biokemiska analyser. Cellen kyls vanligtvis över natten före användning för att bevara enzymatiska aktiviteter.
Nackdelar med pressen inkluderar att den inte är väl lämpad för bearbetning av stora provvolymer, och är något svår att använda på grund av enhetens stora vikt (ca 14 kg). En annan nackdel är att den ingående cellvolymen måste vara fri från stora cellklumpar, vilket kräver ett förbearbetningssteg (vanligtvis genom sonikering). Om cellklumpar inte avlägsnas före bearbetning sker igensättning av ventilen och enheten måste rengöras noggrant innan bearbetningen kan fortsätta. Som ett resultat finner många proteinreningslaboratorier att användningen av lysozym och sonikering är tillräcklig för rutinmässigt uttryck av bakteriellt protein.
Andra tekniker, såsom ultraljudsbehandling och kulkvarnar , finns tillgängliga för många av samma ändamål och har sina egna fördelar och nackdelar. Till exempel kan sonikering generera höga skjuvkrafter som bryter cellulärt DNA i små fragment. Med en fransk press kan skjuvkraften noggrant moduleras genom att justera kolvtrycket. Pressen ger en enda passage genom punkten med maximal skjuvkraft, vilket begränsar skador på ömtåliga biologiska strukturer på grund av upprepad skjuvning, vilket sker i andra störningsmetoder.