EHA101

EHA101 var en av de första och mest använda Agrobacterium -hjälparplasmiderna för överföring av växtgen. Skapad 1985 i Mary-Dell Chiltons laboratorium vid Washington University i St. Louis , fick den sitt namn efter doktoranden som konstruerade den. EH står för "Elizabeth Hood" och A för " Agrobacterium ". Hjälparstammen EHA101 är ett derivat av A281, den hypervirulenta A. tumefaciens -stammen som orsakar stora, snabbväxande tumörer på solanaceous växter. Denna stam används för att flytta gener av intresse till många hundra växtarter över hela världen.

För motsträviga grödor som majs , vete och ris används ofta EHA-hjälparstammarna för genöverföring. Dessa stammar är effektiva när det gäller att främja T-DNA-överföring på grund av vir-genernas hypervirulens, vilket tyder på att en högre framgångsfrekvens kan uppnås på dessa "svåra att transformera" grödor eller kultivarer .

Den kromosomala bakgrunden för EHA101 är C58C1, en botad nopalin- stam. Hjälparstammarna härleddes från A281, som är A136(pTiBo542). A281 manipulerades genetiskt genom en dubbel korsning, platsriktad deletion för att ge EHA101, en T-DNA-deleterad stam användbar för målgenöverföring till växter. EHA101 är resistent mot kanamycin genom en npt I-gen i stället för T-DNA. Moderstammen, A281, visar inte antibiotikaresistens vid högre nivåer än normala A. tumefaciens -stammar. Dessutom visar inte andra transkonjuganta stammar i C58C1-bakgrunden denna ökade resistens mot antibiotika. Därför är dessa egenskaper inte bara en manifestation av den kromosomala bakgrunden, utan troligen en interaktion mellan denna Ti-plasmid och den C58-kromosomala bakgrunden.

npt I-genen i stället för T-DNA i EHA101 kräver att binära plasmider som sätts in i stammen kodar för en annan läkemedelsresistens än kanamycin. Stammar EHA105 genererades från EHA101 genom platsriktad deletion av kanamycinresistensgenen från Ti-plasmiden, annars är stammarna identiska. Denna senare stam har varit användbar för växtbioteknologer som använder kanamycin som en selekterbar markör på sina binära plasmider.