Kameleon (protein)

Cameleon är ett konstruerat protein baserat på en variant av grönt fluorescerande protein som används för att visualisera kalciumnivåer i levande celler. Det är en genetiskt kodad kalciumsensor skapad av Roger Y. Tsien och kollegor. Namnet är en sammanblandning av CaM (den vanliga förkortningen av calmodulin ) och kameleont för att indikera det faktum att sensorproteinet genomgår en konformationsförändring och utstrålar med en förändrad våglängd vid kalciumbindning till calmodulinelementet i Cameleon. Cameleon var den första genetiskt kodade kalciumsensorn som kunde användas för ratiometriska mätningar och den första som användes i ett transgent djur för att registrera aktivitet i neuroner och muskelceller. Cameleon och andra genetiskt kodade kalciumindikatorer (GECI) har funnit många tillämpningar inom neurovetenskap och andra biologiområden. Den skapades genom att fusionera BFP , calmodulin , calmodulin-bindande peptid M13 och EGFP .

Mekanism

Det DNA som kodar för cameleonfusionsproteinet måste antingen stabilt eller övergående införas i cellen av intresse. Protein tillverkat av cellen enligt denna DNA-information fungerar sedan som en fluorescerande indikator på kalciumkoncentration. I närvaro av kalcium binder Ca ²⁺ till M13, vilket gör att calmodulin kan svepa runt M13-domänen. Detta för de två GFP-variantproteinerna närmare varandra, vilket ökar FRET -effektiviteten mellan dem.