Trypsinisering

Trypsinisering är processen för celldissociering med hjälp av trypsin , ett proteolytiskt enzym som bryter ner proteiner, för att dissociera vidhäftande celler från kärlet där de odlas. När det tillsätts till en cellkultur bryter trypsin ner de proteiner som gör att cellerna kan fästa vid kärlet. Trypsinisering används ofta för att överföra celler till ett nytt kärl. När trypsiniseringsprocessen är klar kommer cellerna att vara i suspension och se rundade ut.

I experimentella syften odlas celler ofta i behållare som har formen av plastflaskor eller plattor. I sådana kolvar förses cellerna med tillväxtmedium innefattande de essentiella näringsämnena som krävs för proliferation, och cellerna fäster vid behållaren och varandra när de växer.

Denna process av cellodling eller vävnadsodling kräver en metod för att dissociera cellerna från behållaren och varandra. Trypsin, ett enzym som vanligtvis finns i matsmältningskanalen , kan användas för att "smälta" proteinerna som underlättar vidhäftningen till behållaren och mellan celler.

När cellerna har lossnat från sin behållare är det nödvändigt att inaktivera trypsinet, såvida inte trypsinet är syntetiskt, eftersom cellytproteiner också kommer att klyvas med tiden och detta kommer att påverka cellfunktionen. Trypsin hämmas av serum som tillhandahåller de tvåvärda katjonerna som kalcium och magnesium som spelar en roll i både intra- och intercellulär signalering, dvs bildar CAM, så serum tillsätts vanligtvis till behållaren när cellerna har lossnat - detta kan bekräftas genom observation under en mikroskop.

Trypsinisering görs ofta för att tillåta passage av cellerna till en ny behållare, observation för experiment, eller minskning av graden av sammanflytning i kolven genom att avlägsna en procentandel av cellerna.