Transversell relaxationsoptimerad spektroskopi

Transversell relaxationsoptimerad spektroskopi (TROSY) är ett experiment inom protein-NMR- spektroskopi som möjliggör studier av stora molekyler eller komplex.

Tillämpningen av NMR på stora molekyler begränsas normalt av det faktum att linjebredderna i allmänhet ökar med molekylmassan . Större molekyler har längre rotationskorrelationstider och följaktligen kortare transversella relaxationstider (T2 ₎ . Med andra ord NMR-signalen från större molekyler snabbare, vilket leder till linjebreddning i NMR-spektrumet och dålig upplösning .

I ett HSQC- spektrum där frånkoppling inte har tillämpats, uppträder toppar som multipletter på grund av J-koppling . Det avgörande är att de olika multiplettkomponenterna har olika bredd. Detta beror på konstruktiv eller destruktiv interaktion mellan olika avslappningsmekanismer . Typiskt för stora proteiner med höga magnetiska fältstyrkor domineras den tvärgående (T2 _{) -relaxationen av dipol-dipol-mekanismen (DD) och} mekanismen för kemisk skiftanisotropi (CSA). Eftersom relaxationsmekanismerna i allmänhet är korrelerade men bidrar till den totala relaxationshastigheten för en given komponent med olika tecken, avslappnar multiplettkomponenterna med mycket olika totala hastigheter. TROSY-experimentet är utformat för att välja den komponent för vilken de olika avslappningsmekanismerna nästan har avbrutits, vilket leder till en enda, skarp topp i spektrumet. Detta ökar avsevärt både spektral upplösning och känslighet, som båda är på topp när man studerar stora och komplexa biomolekyler.

Detta tillvägagångssätt utökar avsevärt det molekylära massintervallet som kan studeras med NMR, men det kräver i allmänhet höga magnetfält för att uppnå den nödvändiga balansen mellan CSA- och DD-relaxationsmekanismerna; CSAs skalas med fältstyrka, medan dipol-dipolkopplingar är fältoberoende.