TimeSTAMP proteinmärkning
TimeSTAMP (Time – Specific Tag for the Age Measurement of Proteins) är en teknik som uppfanns av Michael Z. Lin vid Roger Tsien -labbet vid University of California, San Diego 2008. Det är en teknik som specifikt kan märka de nysyntetiserade kopiorna av det genetiskt märkta proteinet .
Principen för TimeSTAMP-tekniken
TimeSTAMP-tekniken för märkning av nysyntetiserade proteiner av intresse och är baserad på läkemedelsberoende konservering av epitoptaggar
Ett enkelt diagram som visar strategin för läkemedelsberoende epitopmärkning av nysyntetiserade proteiner finns här: [1] .
I denna teknik, en tagg som finns på alla proteiner som syntetiseras efter engångsadministrering av ett läkemedel med liten molekyl. För att uppnå detta mål införlivas specifik proteasaktivitet för att ge självavlägsnande beteende till en epitoptagg. Sedan används en motsvarande proteashämmare för att blockera avlägsnandet av taggen. Som ett resultat skulle endast de proteiner som syntetiserats efter applicering av inhibitor märkas.
En efterföljande variant av TimeSTAMP möjliggör läkemedelsberoende konservering av fluorescerande proteintaggar.
Tillämpning av TimeSTAMP-teknik
Eftersom TimeSTAMP-tekniken kan uppnå temporärt kontrollerad märkning av nysyntetiserade proteiner av intresse även i tjocka vävnader eller intakta djur och ge en känslig, specifik detektion, kan fördelningen av nysyntetiserat protein i ett levande djur studeras